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PCR儀反應(yīng)的三個(gè)主要步驟簡析
點(diǎn)擊次數(shù)：1886 更新時(shí)間：2020-12-16
PCR儀的PCR技術(shù)是80年代中期發(fā)展起來的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。優(yōu)點(diǎn)是特異、敏感、產(chǎn)率高、快速、簡便、重復(fù)性好、易自動化等。能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA的片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬乃至百萬倍，使肉眼能直接觀察和判斷；可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測鑒定。過去幾天幾星期才能做到的事情，用PCR儀幾小時(shí)便可完成。PCR技術(shù)是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性創(chuàng)舉和里程碑。
PCR儀的PCR反應(yīng)包括三個(gè)主要步驟：
1.Denaturation
是將DNA加熱（至90-95℃）變性，將雙股的DNA加熱后轉(zhuǎn)為單股DNA以做為復(fù)制的模板.
2.Annealing of primers
是令Primers于一定的溫度下（冷卻至55-60℃）附著于模板DNA兩端。
3.Extension of primers
在DNA聚合酶e.g.Taq-polymerase的作用下（加熱至70-75℃）進(jìn)行引物的延長Extension of primers及另一股的合成。
PCR早設(shè)想核酸研究已有100多年的歷史，本世紀(jì)60年代末、70年代初人們致力于研究基因的體外分離技術(shù)。經(jīng)過DNA變性，與合適的引物雜交，用DNA聚合酶延伸引物，并不斷重復(fù)該過程便可克隆tRNA基因。
